培養(yǎng)基是人工地將多種物質(zhì)按各種微生物生長的需要配置而成的一種混合營養(yǎng)基質(zhì),用以培養(yǎng)或分離各種微生物。因此,營養(yǎng)基質(zhì)應當有微生物所能利用的營養(yǎng)成分(包括碳源、氮源、能源、無機鹽、生長因素)和水。根據(jù)微生物的種類和實驗目的的不同,培養(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。 一.按成分的不同分 1.天然培養(yǎng)基 主要成分是復雜的天然有機物質(zhì),如馬鈴薯、豆芽汁、牛肉膏、蛋白胨、血清等。這些復雜天然有機物質(zhì)的成分不*了解,每次所用的原料,其中各成分的數(shù)量也不恒定。這類培養(yǎng)基是實驗室常用的培養(yǎng)基,例如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、馬鈴薯培養(yǎng)基等。 2.合成培養(yǎng)基 用化學成分*了解的純試劑配制而成的培養(yǎng)基,如高氏1號培養(yǎng)基,查氏培養(yǎng)基等。一般用于營養(yǎng)代謝、分類鑒定、菌種選育、遺傳分析等。 二.按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分 1.固體培養(yǎng)基 在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑即為固體培養(yǎng)基。實驗用的凝固劑有瓊脂、明膠和硅膠,后者用于配制自養(yǎng)微生物的固體培養(yǎng)基。對其他多數(shù)微生物來講,以瓊脂zui為合適,一般加入1.5—2.5%即可凝固成固體。此培養(yǎng)基可供分離、鑒定、活菌計數(shù)、菌種保藏等用。 2.半固體培養(yǎng)基 在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑即為半固體培養(yǎng)基,例如瓊脂只需加入0.2—0.7%。常用作細菌動力檢查和菌種保存、噬菌體制劑的制備等。 3.液體培養(yǎng)基 沒有加瓊脂,配好后成液體狀態(tài)的培養(yǎng)基。常用于生理代謝的研究和工業(yè)發(fā)酵等。 三.按培養(yǎng)基的用途分 1.基礎(chǔ)培養(yǎng)基 含有一般細菌生長繁殖需要的基本的營養(yǎng)物質(zhì)。zui常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是上面提及的天然培養(yǎng)基中的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基可作為一些特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。 2.營養(yǎng)培養(yǎng)基(加富培養(yǎng)基) 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì),如血液、血清、酵母浸膏或生長因子等。用以培養(yǎng)對營養(yǎng)要求高的微生物,如培養(yǎng)百日咳桿菌需要含有血液的培養(yǎng)基。 3.鑒別培養(yǎng)基 是一類含有某種特定化合物或試劑的培養(yǎng)基。某種微生物在這種培養(yǎng)基上培養(yǎng)后,它所產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與這種特定的化合物或試劑能發(fā)生某種明顯的特征性反應,根據(jù)這一特征性反應可以將某種微生物與其他中微生物區(qū)別開來。主要用于不同類型微生物的快速鑒定,如用來檢查細菌能否產(chǎn)生硫化氫的醋酸鉛培養(yǎng)基。 4.選擇培養(yǎng)基 利用微生物對某種或某些化學物質(zhì)的敏感性不同,在培養(yǎng)基中加入這類物質(zhì),抑制不需要的微生物生長,而利用所需分離的微生物生長,從而達到分離或鑒別某種微生物的目的,如分離真菌的馬丁氏培養(yǎng)基。既有選擇作用又有鑒別作用的培養(yǎng)基,如鑒別腸道桿菌的遠藤氏培養(yǎng)基。 微生物的生長繁殖除需要一定的營養(yǎng)物質(zhì)以外,還要求適當?shù)腜H范圍。不同微生物對PH的要求不一樣,霉菌和酵母菌的培養(yǎng)基的PH是偏酸性的,而細菌或放線菌的培養(yǎng)基的PH為中性或微堿性的。所以配制培養(yǎng)基時,都要根據(jù)不同微生物對象用稀酸或稀堿將培養(yǎng)基的PH調(diào)到合適的范圍。但配制PH低的瓊脂培養(yǎng)基時,如預先調(diào)好PH并在高壓蒸汽下滅菌,則瓊脂因水解不能凝固,因此,應將培養(yǎng)基的成分和瓊脂分開滅菌后再混合,或在中性PH條件下滅菌后,再調(diào)整PH。 |